CaymanChemical人活化蛋白-1报告物测定系统()背景:
该活化蛋白-1(AP-1)测定试剂盒是一种全功能萤火虫荧光素酶报告物测定系统。除了AP-1报告细胞外,该试剂盒还提供了两种用于细胞培养和稀释测试样品的优化培养基,即参考AP-1活化剂Phorbol12肉豆蔻酸13乙酸酯(PMA)、荧光素酶检测试剂、细胞培养就绪测定板和详细方案。
INDIGO的报告细胞含有一个与串联TPA反应元件(TRE)序列功能性连接的工程荧光素酶报告基因,该序列位于最小启动子的上游。活化的AP-1与其TRE结合以驱动Luc基因表达。因此,量化处理的报告细胞中荧光素酶活性的变化提供了AP-1活性变化的敏感替代测量。因此,该报告测定法的主要应用是筛选受试化合物,以量化它们可能对AP-1产生的任何激活或抑制功能活性。
报告细胞使用INDIGO的专有CryoMite制备?过程这种冷冻保存方法在解冻后产生高细胞活力,并提供了将健康报告细胞立即分配到测定板中的便利。不需要中间准备步骤,如细胞的旋转和冲洗、活力测定或测定设置前的细胞滴度调整。
INDIGO的ReporterAssays是全方位的基于细胞的检测系统。除了AP-1报告细胞外,该试剂盒还提供了两种用于细胞培养和稀释测试样品的优化培养基,即参考AP-1活化剂Phorbol12肉豆蔻酸13乙酸酯(PMA)、荧光素酶检测试剂和细胞培养就绪测定板。
CaymanChemical艾美捷人活化蛋白-1报告物测定系统特点:
1、筛选测试样本,以量化其可能对人类AP-1产生的激活或抑制功能活性
2、稳健的技术为一致和可重复的数据采集提供持续的响应
3、试剂盒中包括:即用、预转染的报告细胞
优化的培养基
参考活化剂
荧光素酶检测试剂
细胞培养物检测板
CaymanChemical人活化蛋白-1报告物测定系统化验方案:
INDIGO的检测试剂盒利用了极低的背景、高灵敏度和生物发光报告基因技术的宽线性动态范围。报告细胞包含编码甲虫荧光素酶的cDNA,这是一种源自62kD的蛋白质来自北美萤火虫(Photinuspyralis)。荧光素酶在Mg+2依赖性反应中催化D-荧光素的单氧化,该反应消耗O2和ATP作为共底物,并产生氧荧光素、AMP、PPi、CO2和光子发射的产物。
使用光度计定量反应的发光强度,并在相对光单位(RLU)的术语。INDIGO的检测试剂盒具有专门配制的荧光素酶检测试剂在启动荧光素酶反应后5至90+分钟之间稳定发光。结合至少5分钟的反应休息期,确保发光曲线从而允许批量处理测定板。通过做因此,从一个板到下一个板的所有样品孔的信号输出可以直接在实验组内进行比较。
CaymanChemical人活化蛋白-1报告物测定系统文献参考:
1、BejjaniFet.al.,,BiochimBiophysActaRevCancer;(1):11-23.
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2、LeeW,MitchellP,TjianR.,,Cell,49(6):-.
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3、ShaulianEandKarinM.,,NatureCellBiology;4(5):E-6.
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