"在HPTLC系统中，每张板都代表一个新的分析体系。每次进行分析操作当天，在每个板上都应执行SST，以验证其是否符合实验条件要求。SST通常仅适用于包含预设限值在内的单个方法。如果SST失败，则样品检测数据无效，无法进行评估。"
Dr.TinDo(CAMAG实验室主管)
在高效薄层色谱(HPTLC)中，应用合适的系统适用性测试(SST)在每个薄层板上对分析系统进行验证非常重要，是数据有效性的前提，一般是选择几个具有特定分析方法的化学对照物质作为参考。但目前常用的SST实验设计具有一定的局限性，列举《美国药典》和《欧洲药典》中关于SST的描述内容可见下表：
目前常用SST方法及其局限性
SST新思路
HPTLC通用混标
针对上文列出的局限性，UHM应运而生，可用于在常规分析中验证HPTLC结果，实现对HPTLC色谱图的整个RF范围进行验证。
什么是UHM？
UHM,theUniversalHPTLCMix，即高效薄层色谱通用混标，由8种不同性质的化合物组成，广泛适用于各种HPTLC方法的SST测试。
HPTLC通用混标(UHM)的开发
01
物质的选择
选择的物质最好具有安全、稳定、无需衍生化即可检测、易于获得且价格低廉等特点。据此，实验人员从数以千计的物质列表中，选择了24种化合物。
针对这24种化合物在HPTLC板上的色谱行为进行研究，分别用20种不同展开剂进行洗脱，涵盖尽量广泛的极性和选择性，最终从中选择了8种化合物：鸟苷、舒利苯酮、胸苷、扑热息痛、邻苯二甲酰亚胺、氢芴、噻吨酮和2-苯并三唑四甲基丁基苯酚。
图为UHM在不同展开系统下的色谱行为，在各条件下的选择性均可保证至少3-4个有效化合物的条带均匀分布在所需评估的范围内
02
评估响应特性
相对湿度对每种物质的选择性有不同的影响。当板的活性偏离预期的相对湿度0-5%、33%、75%或%时，UHM的响应特性可以清楚地检测出这些偏离。
对甲苯-乙酸乙酯90:10(V/V)的展开剂组成施加每种组分溶剂±10%的变化，用UHM获得的HPTLC指纹图谱有显著反应。
针对相同的展开剂进行不同饱和参数设置的考察（不饱和、部分饱和和充分饱和)。结果表明，部分饱和RF值相对增加，而完全饱和RF值相对降低，UHM可以检测饱和操作的一般影响。
03
评估UHM性能
分别在实验室内和实验室间进行检测，使用3种展开剂并得出ΔRF，评估UHM性能。
在实验室内试验中，ΔRF为0.;实验室间试验为0.。
04
评估不同类型的硅胶薄层板
在色谱系统中薄层板的材料是一个关键参数。由于硅胶的规格不同，例如不同的粘合剂或荧光指示剂的存在，不同的薄层板可能会有不同的选择性。
使用UHM评估了6种不同类型的涂敷型硅胶薄层板，使用相同的展开剂，乙酸乙酯-甲酸-乙酸-水:11:11:26(V/V)。
UHM在不同类型硅胶薄层板上的选择性评估
UHM与现行SST比较
使用UHM和现行的SST进行精油标准鉴别。
在原有方法中乙酸异丁香酚[1a]和异丁香酚[1b]被定义为SST。作为特定标记物，使用的是芳樟醇和乙酸芳樟酯，或冰片和乙酸冰片酯。在这个例子中，还测试了3种精油：薄荷油、薰衣草油和肉豆蔻油。
针对UHM和当前SST的每个成分，计算平均RF值及其预测区间。下图数据表明，UHM成分的预测区间与原始SST的预测区间在同一范围内。
UHM成分的预测区间与
原始SST的预测区间在同一范围内
数据来源:CAMAG与Anchrom印度合作实验室
总结
HPTLC通用混标(UHM)是当前SST的一个很好的替代方法。
8种不同极性、不同化学类别组分的混合物价格低廉、稳定，对验证色谱系统的变化具有良好的响应性。
与当前的SST相比，UHM的成分显示出与已建立的SST的物质和特定标记物具有相似的预测区间。
UHM可以检测展开剂梯度的变化或饱和效应，而许多已建立的SST通常只能描述有限的RF范围。
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由此可见，高效薄层色谱越来越受实验人员的
